PHF8 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407306-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PHF8O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PHF8 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PHF8 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PHF8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PHF8 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407306-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PHF8 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407306-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHF8 codifica uma desmetilase de lisina em histonas contendo domínio JmjC, que remove preferencialmente marcas repressoras como H3K9me2/1 e também pode atuar em estados de metilação de H4K20, conectando o remodelamento da cromatina ao controle transcricional. Por meio do reconhecimento, mediado por seu dedo PHD, da metilação de H3K4, PHF8 é recrutada para promotores ativos, onde modula programas de expressão gênica dependentes da RNA polimerase II. PHF8 participa da regulação epigenética da progressão do ciclo celular, da diferenciação neuronal e da dinâmica da cromatina associada a danos no DNA. A desregulação ou mutação de PHF8 tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a redes transcricionais relevantes para o câncer, tornando-a um alvo útil para o estudo da regulação gênica dependente de cromatina.
PHF8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PHF8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PHF8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PHF8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PHF8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.