Plásmido Doble Nickase (h) PHF14: sc-411313-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)PHF14 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa PHF14 (h) y el plásmido de doble nickasa PHF14 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a PHF14. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) PHF14 | sc-411313-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) PHF14 | sc-411313-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PHF14 (proteína 14 con dedo PHD) es un factor nuclear asociado a la cromatina implicado en la regulación de la transcripción mediante el reconocimiento de marcas de histonas y la modulación de la accesibilidad de la cromatina. Participa en programas de regulación génica que influyen en la proliferación celular, la diferenciación y los estados transcripcionales específicos de linaje, lo que lo vincula a vías de control del desarrollo y epigenéticas. La actividad alterada de PHF14 se ha asociado con redes de expresión desreguladas relevantes para la señalización oncogénica y la remodelación tisular, lo que lo hace de interés en estudios de biología tumoral y plasticidad celular. En células humanas, PHF14 ofrece un punto de entrada manejable para dilucidar cómo los lectores de cromatina moldean las salidas transcripcionales y los fenotipos posteriores.
PHF14 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus PHF14 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de PHF14. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de PHF14. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con PHF14 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.