Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PGRP-S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423451
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PGRP-S O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PGRP-S, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PGRP-S Anticorpo (G-1): sc-365304
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PGRP-S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423451 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Pglyrp1 codifica a proteína de reconhecimento de peptidoglicano S (PGRP-S), uma molécula secretada de reconhecimento de padrões que se liga ao peptidoglicano bacteriano e contribui para a vigilância imunitária inata. Em camundongos, a PGRP-S ajuda a modular respostas antimicrobianas e a sinalização inflamatória em locais mucosos e sistêmicos, ao moldar a ativação de leucócitos e vias de detecção microbiana. Alterações na atividade da família PGRP têm sido associadas a interações hospedeiro–microrganismo desreguladas, suscetibilidade a infecções e fenótipos inflamatórios relevantes para tecidos de barreira. Assim, Pglyrp1 é estudado no contexto da homeostase da imunidade inata, da imunidade dependente do microbioma e de modelos de doenças associadas à inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PGRP-S (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pglyrp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pglyrp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pglyrp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PGRP-S.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pglyrp1 para a investigação da sinalização de PGRP-S, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pglyrp1 críticos para a função PGRP-S
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pglyrp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PGRP-S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PGRP-S Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pglyrp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PGRP-S Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PGRP-S (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pglyrp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pglyrp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.