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PGC1a慢病毒激活颗粒(h) | sc-400070-LAC | 200 µl | $455.00 |
PPARGC1A 编码转录共激活因子 PGC1α,它是线粒体生物发生与氧化代谢的核心调控者,可协调核呼吸因子(NRF)、PPAR 信号以及抗氧化基因程序。PGC1α 整合来自 AMPK 与 SIRT1 的信号线索,以重塑能量利用方式、促进脂肪酸氧化,并以细胞类型依赖的方式调节糖异生与产热相关的转录网络。PPARGC1A 活性异常与代谢失衡、线粒体功能障碍及应激反应相关,这些过程与胰岛素抵抗、神经退行性变以及心脏代谢表型密切相关。在人源细胞模型中,PPARGC1A 常被用于解析呼吸作用的转录调控、活性氧(ROS)处理以及对营养与类似运动信号的适应性反应。
PGC1a 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 PPARGC1A 表达。
PGC1a 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在PPARGC1A转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性PGC1a表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 PPARGC1A 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。