Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Peroxin 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405639-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Peroxin 3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Peroxin 3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Peroxin 3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PEX3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Peroxin 3 Anticorpo (B-6): sc-515149
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Peroxin 3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405639-NIC | 20 µg | $410.00 |
PEX3 codifica a peroxina 3, uma proteína de membrana essencial que inicia a biogénese dos peroxissomas ao recrutar peroxinas citosólicas e permitir a inserção de proteínas da membrana peroxissomal no organelo em desenvolvimento. Através do seu papel na montagem dos peroxissomas, o PEX3 sustenta vias do metabolismo lipídico, incluindo a β-oxidação de ácidos gordos de cadeia muito longa, a biossíntese de plasmalogénios e a homeostase das espécies reativas de oxigénio. A disrupção de PEX3 compromete a formação de peroxissomas e perturba o equilíbrio redox celular e a composição lipídica das membranas, processos centrais para a adaptação metabólica em muitos tipos celulares. Variantes patogénicas com perda de função em PEX3 estão associadas a distúrbios da biogénese dos peroxissomas no espectro de Zellweger, sublinhando a sua relevância para estudos sobre mecanismos de doenças metabólicas hereditárias.
Peroxin 3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PEX3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PEX3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PEX3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PEX3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.