Peptide YY Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403446

Descripción general

PYY codifica el péptido YY, un péptido endocrino de origen intestinal secretado principalmente por células enteroendocrinas L en respuesta a la ingesta de nutrientes y procesado en formas bioactivas que señalan a través de miembros de la familia de receptores del neuropéptido Y, en particular Y2. El péptido YY modula la motilidad y la secreción gastrointestinales, así como las señales de saciedad dentro de los circuitos del eje intestino–cerebro, integrando las señales enteroendocrinas con las vías hipotalámicas y vagales. Mediante estos procesos mediados por receptores tipo GPCR, PYY contribuye a la homeostasis energética y a la regulación metabólica, y se han asociado patrones de expresión alterados con la obesidad, la diabetes tipo 2 y trastornos gastrointestinales. PYY también se utiliza como marcador en estudios de diferenciación enteroendocrina y biología del epitelio intestinal.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Peptide YY (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PYY en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PYY junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PYY tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Peptide YY.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PYY para la investigación de la señalización de Peptide YY, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PYY críticos para la función de Peptide YY
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PYY para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Peptide YY CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Peptide YY CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PYY. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Peptide YY (h) y el plásmido HDR Peptide YY (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PYY para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PYY definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.