PELP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429042

Visão geral

PELP1 (proteína 1 rica em prolina, ácido glutâmico e leucina), codificada pelo gene Pelp1 de camundongo, é um correagulador multifuncional de receptores nucleares e uma plataforma (scaffold) associada à cromatina que integra a sinalização de hormônios esteroides ao controle transcricional e epigenético. Ela coordena interações entre a sinalização do receptor de estrogênio e complexos de remodelamento de cromatina, influenciando a transcrição dependente da RNA polimerase II, modificações de histonas e a progressão do ciclo celular. A PELP1 também se conecta a vias de quinases e a respostas a danos no DNA, ligando sinais de fatores de crescimento a programas de expressão gênica e à manutenção do genoma. A atividade e a localização desreguladas de PELP1 têm sido associadas à proliferação aberrante, à sinalização endócrina alterada e a redes transcricionais oncogênicas, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de biologia responsiva a hormônios e de vias associadas a tumores.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PELP1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pelp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pelp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pelp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PELP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pelp1 para a investigação da sinalização de PELP1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pelp1 críticos para a função PELP1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pelp1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PELP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PELP1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pelp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PELP1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PELP1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pelp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pelp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.