PELO Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405192-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PELOO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PELO (h) e o Plasmídeo Double Nickase PELO (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PELO. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PELO Anticorpo (F-4): sc-393418
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PELO Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405192-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PELO Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405192-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PELO (homólogo de pelota) codifica um fator conservado de resgate ribossomal que reconhece ribossomos em tradução que ficam estagnados e promove a resolução de mRNAs aberrantes, sustentando a homeostase global da tradução e a vigilância de mRNA. PELO atua em conjunto com HBS1L nas vias de degradação “no-go” e de controle de qualidade ribossomal, facilitando a dissociação de complexos 80S parados e a reciclagem das subunidades ribossomais. Por seu papel na proteostase e na adaptação ao estresse, alterações na atividade de PELO podem influenciar o controle do ciclo celular, programas de diferenciação e a suscetibilidade a estresse proteotóxico e genotóxico. A desregulação de redes de controle de qualidade da tradução que envolvem PELO tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a estados celulares relacionados ao câncer, tornando-o relevante para estudos mecanísticos do metabolismo de RNA e da fidelidade da síntese proteica.
PELO O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PELO em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PELO. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PELO. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PELO interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.