Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PEA3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401704-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PEA3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PEA3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PEA3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ETV4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PEA3 Anticorpo (G-10): sc-166629
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PEA3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401704-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PEA3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401704-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ETV4 codifica o fator de transcrição PEA3, da família ETS, um regulador de ligação ao DNA que integra sinais mediados por MAPK/ERK para controlar programas gênicos envolvidos na proliferação celular, diferenciação, transição epitélio-mesenquimal e migração. O PEA3 modula a transcrição a jusante de receptores tirosina-quinase e coopera com AP-1 e outros cofatores para regular alvos associados à remodelação da matriz extracelular e a fenótipos ligados à invasão. A expressão ou atividade desregulada de ETV4 é frequentemente associada a estados de sinalização oncogênica e a alterações no comportamento metastático em diversos contextos tumorais, tornando-o um nó relevante para o estudo do controle transcricional da progressão tumoral. Além disso, ETV4 participa de programas de desenvolvimento e de especificação de linhagem, o que reforça sua utilidade em estudos mecanísticos de transições de estado celular.
PEA3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ETV4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ETV4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ETV4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ETV4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.