PDGF-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401977

Visão geral

O gene **PDGFC** codifica o fator de crescimento derivado de plaquetas C (**PDGF-C**), um fator de crescimento secretado que é ativado por processamento proteolítico e sinaliza principalmente por meio de complexos de receptores de PDGF para regular a proliferação e a migração de células mesenquimais, bem como a remodelação da matriz extracelular. O PDGF-C contribui para a comunicação parácrina entre os compartimentos estromal e epitelial e aciona vias a jusante como **PI3K–AKT** e **MAPK/ERK**, que coordenam o desenvolvimento e o reparo dos tecidos. A sinalização desregulada de PDGF-C está associada à angiogênese aberrante, à remodelação relacionada à fibrose e às interações tumor–estroma em múltiplos contextos de doença. Como resultado, o **PDGFC** é frequentemente estudado em modelos de biologia vascular, reparo de feridas, microambientes inflamatórios e crosstalk de sinalização oncogênica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PDGF-C (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PDGFC em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PDGFC, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PDGFC na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PDGF-C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PDGFC para a investigação da sinalização de PDGF-C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PDGFC críticos para a função PDGF-C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PDGFC para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo PDGF-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PDGF-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PDGFC. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo PDGF-C Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PDGF-C (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PDGFC para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PDGFC definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.