Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PDE3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401773
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDE3B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PDE3B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDE3B Anticorpo (F-9): sc-376823
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDE3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-401773 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PDE3B codifica a fosfodiesterase 3B, uma hidrolase de dupla especificidade para cAMP/cGMP que molda microdomínios de nucleótidos cíclicos e controla a sinalização dependente de PKA e PKG. Em adipócitos e hepatócitos, a PDE3B integra sinais de insulina e catecolaminas para regular a lipólise, programas gluconeogénicos e o armazenamento de energia, por meio de vias que incluem PI3K–AKT e redes de fosforilação a jusante. Em células β pancreáticas, a PDE3B modula o acoplamento estímulo-secreção ao ajustar a dinâmica de cAMP que influencia a exocitose de grânulos de insulina. A desregulação da atividade de PDE3B tem sido associada a fenótipos metabólicos envolvendo sensibilidade à insulina, sinalização relacionada com obesidade e homeostase lipídica, sustentando a sua utilidade em estudos mecanísticos de biologia endócrina e cardiometabólica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PDE3B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PDE3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PDE3B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PDE3B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PDE3B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PDE3B para a investigação da sinalização de PDE3B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PDE3B críticos para a função PDE3B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PDE3B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PDE3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo PDE3B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PDE3B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PDE3B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR PDE3B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PDE3B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PDE3B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.