Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PBR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401624-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PBRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PBR (h) e o Plasmídeo Double Nickase PBR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TSPO. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PBR Anticorpo (3D8-B2): sc-293216
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PBR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401624-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PBR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401624-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TSPO, também conhecido como receptor benzodiazepínico periférico (PBR), é uma proteína de 18 kDa da membrana externa mitocondrial que participa do transporte de colesterol, da esteroidogênese e da regulação da permeabilidade mitocondrial e da bioenergética. Está funcionalmente ligado às respostas ao estresse mitocondrial, à homeostase de espécies reativas de oxigênio e à sinalização apoptótica, e é amplamente utilizado como marcador molecular de ativação microglial e neuroinflamação. Alterações na expressão do TSPO e em sua localização mitocondrial têm sido associadas a processos inflamatórios e neurodegenerativos, bem como ao metabolismo e à proliferação de células cancerosas. Como um hub associado à mitocôndria, o TSPO oferece um ponto de entrada acessível para estudar a comunicação cruzada entre o tráfego de lipídios, o estresse oxidativo e a sinalização imune inata.
PBR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TSPO em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TSPO. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TSPO. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TSPO interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.