Plasmide Double Nickase (h) PATZ1: sc-404881-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) PATZ1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide PATZ1 Double Nickase (h) et le plasmide PATZ1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant PATZ1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: PATZ1 Antibody (H-2): sc-393223
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) PATZ1 | sc-404881-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) PATZ1 | sc-404881-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PATZ1 (protéine 1 à doigts de zinc contenant des motifs POZ/BTB et AT-hook) est un facteur de transcription nucléaire qui se lie à l’ADN riche en AT via des doigts de zinc et des motifs AT-hook, et régule des programmes d’expression génique contrôlant la prolifération, la différenciation et l’apoptose. Il agit au sein de réseaux régulateurs associés à la chromatine en modulant la répression et l’activation transcriptionnelles, notamment via des interactions fonctionnelles avec les réponses dépendantes de p53 et d’autres circuits transcriptionnels du développement. Une expression ou une activité dérégulée de PATZ1 a été associée à des altérations des décisions de destinée cellulaire et de la stabilité génomique, avec des liens rapportés dans de multiples contextes tumoraux ainsi que dans des phénotypes neurodéveloppementaux. Ces propriétés font de PATZ1 une cible utile pour analyser le contrôle transcriptionnel, la spécification de lignée et les voies de réponse au stress dans des modèles de cellules humaines.
PATZ1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus PATZ1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de PATZ1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de PATZ1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de PATZ1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.