Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
patched/PTCH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400457
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- patched/PTCH1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico patched/PTCH1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:patched/PTCH1 Anticorpo (A-2): sc-518044
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
patched/PTCH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400457 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PTCH1 codifica o Patched, um recetor transmembranar com 12 passagens que restringe a sinalização Hedgehog ao inibir o SMO na ausência de ligando. A ligação de Sonic/Indian/Desert Hedgehog alivia essa repressão, permitindo programas de transcrição dependentes de GLI que regulam o padrão embrionário, a homeostase dos tecidos e decisões de destino celular. A atividade de PTCH1 liga o transporte de esteróis na membrana e o tráfego ciliar ao output da via, integrando sinais que modulam a proliferação e a diferenciação. A desregulação da sinalização PTCH1–Hedgehog está implicada em doenças do desenvolvimento e processos oncogénicos, tornando o PTCH1 um nó-chave para estudos da via e de relações genótipo–fenótipo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO patched/PTCH1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene PTCH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do PTCH1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do PTCH1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína patched/PTCH1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de PTCH1 para a investigação da sinalização de patched/PTCH1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) PTCH1 críticos para a função patched/PTCH1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos PTCH1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo patched/PTCH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo patched/PTCH1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus PTCH1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo patched/PTCH1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR patched/PTCH1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia PTCH1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo PTCH1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.