Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PAR4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401142-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PAR4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase PAR4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase PAR4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PAWR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PAR4 Anticorpo (A-10): sc-1666
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PAR4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401142-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
PAR4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401142-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PAWR codifica a proteína pró-apoptótica PAR4 (prostate apoptosis response-4), um fator associado à supressão tumoral que modula as vias intrínseca e extrínseca de apoptose e antagoniza a sinalização pró-sobrevivência. A PAR4 influencia programas de transcrição e de resposta ao estresse por meio de interações com isoformas atípicas de PKC, nós regulatórios de NF-κB e a maquinaria apoptótica, conectando-se assim ao controle de decisões de destino celular sob estresse genotóxico e inflamatório. Alterações na expressão de PAWR/PAR4 foram relatadas em diversos cânceres humanos e estão associadas a mudanças na sensibilidade à apoptose, na diferenciação celular e no comportamento metastático. Além do contexto oncológico, a PAR4 tem sido implicada em neurodegeneração e outros distúrbios nos quais a desregulação da morte celular e da sinalização de estresse contribui para a patologia.
PAR4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PAWR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PAWR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PAWR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PAWR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.