Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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PAPP-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422113
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PAPP-A O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PAPP-A, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PAPP-A Anticorpo (B-7): sc-365226
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PAPP-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422113 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Pappa de camundongo codifica a proteína plasmática A associada à gravidez (PAPP-A), uma metaloproteinase secretada que cliva proteínas de ligação aos fatores de crescimento semelhantes à insulina (IGF), com destaque para a IGFBP4, aumentando a biodisponibilidade local de IGF. Ao modular a sinalização de IGF1/IGF2 por meio do IGF1R e das cascatas downstream PI3K–AKT e MAPK, a PAPP-A influencia a proliferação, a sobrevivência e a diferenciação celulares, além da remodelação da matriz extracelular. A atividade da PAPP-A tem sido associada a processos como biologia placentária e reprodutiva, comportamento do músculo liso vascular e reparo tecidual, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de regulação do crescimento e de remodelação associada à inflamação. O controle desregulado do eixo de IGF envolvendo a PAPP-A é frequentemente investigado em modelos de disfunção metabólica, patologia cardiovascular e interações estromais associadas ao câncer, sem implicar desfechos clínicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PAPP-A (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pappa em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pappa, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pappa na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PAPP-A.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pappa para a investigação da sinalização de PAPP-A, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pappa críticos para a função PAPP-A
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pappa para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PAPP-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PAPP-A Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pappa. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PAPP-A Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PAPP-A (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pappa para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pappa definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.