palladin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-428317-KO-2

Visão geral

O gene Palld em camundongos codifica a paladina (palladin), uma proteína de andaime associada à actina que coordena a organização do citoesqueleto ao se ligar a reguladores de actina e interligar componentes em fibras de estresse, adesões focais e outros complexos de adesão. A paladina contribui para o controle da forma celular, a maturação das adesões e a migração direcionada, integrando sinais de GTPases da família Rho e de vias que regulam a contratilidade actomiosina e as interações com a matriz extracelular. Alterações na expressão ou na localização da paladina têm sido associadas a remodelamento tecidual anormal e a fenótipos invasivos em contextos relevantes para o câncer, tornando o Palld um alvo útil para estudar a desregulação do citoesqueleto. No sistema murino, a perturbação de Palld é comumente usada para dissecar mecanismos de motilidade, mecanotransdução e sinalização dependente de adesão em modelos de desenvolvimento e de doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO palladin (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Palld em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Palld, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Palld na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína palladin.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Palld para a investigação da sinalização de palladin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Palld críticos para a função palladin
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Palld para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo palladin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo palladin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Palld. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo palladin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR palladin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Palld para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Palld definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.