PAFAH1B3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422104
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PAFAH1B3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PAFAH1B3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PAFAH1B3 Anticorpo (37-K): sc-81950
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PAFAH1B3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422104 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Pafah1b3 codifica a subunidade catalítica PAFAH1B3, uma fosfolipase dependente de serina que hidrolisa o fator ativador de plaquetas (PAF) e fosfolipídios bioativos relacionados. Ao modular segundos mensageiros lipídicos, a PAFAH1B3 contribui para a homeostase de membranas e influencia vias downstream de sinalização inflamatória, respostas ao estresse e remodelação metabólica. Alterações na atividade de PAFAH1B3 têm sido associadas a mudanças na composição lipídica celular e a programas ligados à proliferação, reforçando sua relevância em estudos de metabolismo de células cancerígenas e regulação imune. Em modelos murinos, Pafah1b3 oferece um ponto de entrada viável para investigar o catabolismo de fosfolipídios e seu impacto na fisiologia tecidual e na sinalização lipídica associada a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PAFAH1B3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pafah1b3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pafah1b3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pafah1b3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PAFAH1B3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pafah1b3 para a investigação da sinalização de PAFAH1B3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pafah1b3 críticos para a função PAFAH1B3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pafah1b3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PAFAH1B3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PAFAH1B3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pafah1b3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PAFAH1B3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PAFAH1B3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pafah1b3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pafah1b3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.