Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
PACAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437378
- alvos específicos: rat
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PACAP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (r) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PACAP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PACAP Anticorpo (F-2): sc-166180
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PACAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) | sc-437378 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O polipeptídeo ativador da adenilato ciclase da hipófise (PACAP; Adcyap1) é um neuropeptídeo conservado que sinaliza principalmente por meio do receptor PAC1 e também pode ativar receptores VPAC para regular a transcrição dependente de cAMP/PKA e de MAPK/ERK. Nos sistemas nervoso e neuroendócrino de ratos, o PACAP modula a excitabilidade neuronal, a liberação de neurotransmissores, a sinalização do eixo do estresse e programas de desenvolvimento, incluindo o crescimento de neuritos e a sobrevivência celular. A sinalização induzida por PACAP se cruza com a homeostase do cálcio, a plasticidade sináptica e a regulação de mediadores inflamatórios, conectando essa via a mecanismos relevantes para o processamento da dor, comportamentos relacionados ao estresse e neuroinflamação. A atividade desregulada do PACAP tem sido associada a alterações no controle autonômico e metabólico e foi investigada em modelos de fenótipos semelhantes à enxaqueca e de vulnerabilidade neurodegenerativa.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PACAP (r) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rat. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PACAP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de PACAP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função PACAP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PACAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) e pelo PACAP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PACAP Plasmídeo HDR (r) e o Plasmídeo HDR PACAP (r2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.