p54/nrb慢病毒激活颗粒(m): sc-424729-LAC

小鼠 Nono 基因编码 p54/nrb（NONO），这是一种属于 DBHS 家族的多功能核内 RNA/DNA 结合蛋白，可与 SFPQ/PSPC1 形成异源二聚体，以组织旁斑（paraspeckles），并协调转录、前体 mRNA 剪接以及 RNA 滞留。p54/nrb 参与 DNA 损伤应答与修复，包括在非同源末端连接（NHEJ）中的作用；同时还能通过与 RNA 聚合酶 II 相关复合体的相互作用，将信号依赖性的转录与 RNA 加工过程耦联起来。通过调控控制细胞周期进程、分化与应激反应的基因表达程序，NONO 活性异常已与基因组不稳定以及与癌症和神经发育表型相关的异常转录网络相联系。作为核糖核蛋白复合体组装的支架，p54/nrb 还会影响核内小体动态以及长链非编码 RNA（lncRNA）介导的调控，因此是研究核内组织机制的有用靶点。

p54/nrb 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Nono 表达。

p54/nrb 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Nono转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性p54/nrb表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Nono 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。