Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p53R2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402192
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p53R2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico p53R2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p53R2 Anticorpo (H-3): sc-137173
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p53R2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402192 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
RRM2B codifica a p53R2, uma pequena subunidade da ribonucleotídeo redutase induzível por p53, que fornece desoxirribonucleotídeos para a síntese e o reparo do DNA, particularmente em condições de estresse. A p53R2 dá suporte à manutenção do DNA mitocondrial e contribui para o equilíbrio redox e a sobrevivência celular durante o estresse replicativo ao sustentar os estoques de dNTPs. Funcionalmente, ela conecta a resposta a dano no DNA, a sinalização de p53 e o metabolismo de nucleotídeos, influenciando a estabilidade do genoma e o controle de checkpoints. A desregulação de RRM2B tem sido associada a fenótipos de depleção de DNA mitocondrial e à adaptação ao estresse relacionada ao câncer, tornando-o relevante para estudos de manutenção genômica e reprogramação metabólica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p53R2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene RRM2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do RRM2B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do RRM2B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p53R2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de RRM2B para a investigação da sinalização de p53R2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) RRM2B críticos para a função p53R2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos RRM2B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo p53R2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo p53R2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus RRM2B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo p53R2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR p53R2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia RRM2B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo RRM2B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.