p53 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416469-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p53O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase p53 (h) e o Plasmídeo Double Nickase p53 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TP53. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p53 Anticorpo (DO-1): sc-126
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p53 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416469-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
p53 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416469-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TP53 codifica o supressor tumoral humano p53, um fator de transcrição específico de sequência que integra sinais de estresse celular para coordenar respostas a danos no DNA, parada do ciclo celular, senescência e apoptose. A atividade de p53 é regulada por modificações pós-traducionais e por controle de feedback via eixo MDM2, e ela modula vias que incluem os checkpoints G1/S e G2/M, a recombinação homóloga e o reparo por excisão de nucleotídeos. A disrupção da função de TP53 altera a estabilidade genômica, as decisões de destino celular e programas transcricionais ligados à transformação oncogênica. TP53 está entre os genes mais frequentemente alterados em cânceres humanos, tornando p53 um nó central para o estudo da sinalização de estresse, manutenção do genoma e biologia tumoral.
p53 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TP53 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TP53. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TP53. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TP53 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.