P2Y9 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-429620-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- P2Y9O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase P2Y9 (m) e o Plasmídeo Double Nickase P2Y9 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Lpar4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
P2Y9 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-429620-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene **Lpar4** de camundongo codifica o receptor de ácido lisofosfatídico **P2Y9**, um **GPCR** que acopla sinais extracelulares de **LPA** a proteínas G heterotriméricas para regular cascatas de segundos mensageiros, como a ativação da fosfolipase C, a mobilização de cálcio intracelular e a sinalização **MAPK/ERK**. Por meio dessas vias, o P2Y9 influencia a migração celular, a remodelação do citoesqueleto, a proliferação e programas de sobrevivência que moldam o desenvolvimento tecidual e respostas inflamatórias. A sinalização **LPA–LPAR4** também interage com a atividade de GTPases da família **Rho** e pode modular o **cAMP** dependendo do contexto celular, conectando a ativação do receptor a mudanças transcricionais e metabólicas mais amplas. A desregulação da sinalização de receptores de LPA tem sido associada a fibrose, disfunção imune e fenótipos associados a tumores, tornando **Lpar4** um alvo relevante para estudos mecanísticos de sinalização dirigida pelo microambiente.
P2Y9 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Lpar4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Lpar4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Lpar4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Lpar4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.