P2Y5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426423
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- P2Y5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico P2Y5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
P2Y5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426423 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Lpar6 codifica o receptor P2Y5, um receptor acoplado à proteína G responsivo ao ácido lisofosfatídico (LPA), implicado na detecção de mediadores lipídicos e na sinalização a jusante por vias que regulam a dinâmica do citoesqueleto, a polaridade celular e a diferenciação. Em tecidos de camundongo, a atividade de P2Y5 conecta o LPA extracelular a redes intracelulares de segundos mensageiros que podem influenciar as saídas de sinalização de MAPK e da família Rho, moldando processos como a organização epitelial e a biologia do folículo piloso. Estudos genéticos e funcionais associam LPAR6/P2Y5 a fenótipos de crescimento capilar e ao desenvolvimento ectodérmico, e alterações na sinalização de receptores de LPA são amplamente relevantes em microambientes inflamatórios e fibróticos. Como resultado, Lpar6 oferece um ponto de partida útil para dissecar a sinalização lipídica dirigida por GPCR e seus efeitos sobre o comportamento celular em modelos fisiologicamente relevantes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO P2Y5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Lpar6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Lpar6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Lpar6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína P2Y5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Lpar6 para a investigação da sinalização de P2Y5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Lpar6 críticos para a função P2Y5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Lpar6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo P2Y5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo P2Y5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Lpar6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo P2Y5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR P2Y5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Lpar6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Lpar6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.