P2Y4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-425395-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- P2Y4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase P2Y4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase P2Y4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para P2ry4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
P2Y4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-425395-NIC | 20 µg | $410.00 |
P2ry4 codifica o receptor murino P2Y4, um receptor purinérgico acoplado à proteína G (GPCR) ativado por nucleotídeos extracelulares, que se acopla predominantemente a Gq/11 para estimular a sinalização da fosfolipase C. A mobilização de cálcio a jusante e vias dependentes de PKC conectam o P2Y4 à regulação do transporte iônico epitelial, da secreção mucosa e da contratilidade do músculo liso, com funções adicionais na sinalização de células imunes e na homeostase tecidual. A sinalização purinérgica via GPCR se cruza com cascatas inflamatórias, função de barreira e respostas ao estresse metabólico, tornando o P2ry4 um alvo relevante para estudar a comunicação mediada por nucleotídeos na biologia das vias aéreas, do trato gastrointestinal e do sistema vascular. A atividade desregulada de receptores P2Y tem sido associada a fenótipos inflamatórios e fibróticos em múltiplos sistemas orgânicos, sustentando a investigação mecanística de P2ry4 em modelos relevantes para doenças.
P2Y4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus P2ry4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de P2ry4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função P2ry4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com P2ry4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.