P2X3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432763-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- P2X3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase P2X3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase P2X3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para P2rx3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:P2X3 Anticorpo (B-5): sc-390572
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
P2X3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-432763-NIC | 20 µg | $410.00 |
P2rx3 codifica o receptor P2X3, um canal catiônico trimérico ativado por ATP, enriquecido em neurônios sensoriais periféricos, onde medeia correntes despolarizantes rápidas em resposta a nucleotídeos extracelulares. A atividade do P2X3 regula o influxo de Ca2+ e Na+, modulando a neurotransmissão nociceptiva e a inflamação neurogênica, e se integra a redes de sinalização purinérgica que influenciam a excitabilidade, a transmissão sináptica e a plasticidade dos neurônios sensoriais. Em modelos murinos, alterações na função de P2rx3 têm sido associadas a mecanismos subjacentes a estados de dor inflamatória e neuropática, bem como a vias sensoriais viscerais relevantes para reflexos da bexiga e das vias aéreas. Esse alvo é amplamente utilizado para dissecar a sinalização induzida por ATP em gânglios da raiz dorsal, neurônios trigeminais e circuitos sensoriais relacionados.
P2X3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus P2rx3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de P2rx3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função P2rx3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com P2rx3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.