Date published: 2026-10-27

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p22-phox Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400325-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • p22-phoxO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase p22-phox (h) e o Plasmídeo Double Nickase p22-phox (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYBA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
  • Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p22-phox Anticorpo (E-11): sc-271968
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    Nome do ProdutoNumero de CatalogoUNIDPrecoQdeFAVORITOS

    p22-phox Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-400325-NIC
    20 µg
    $410.00

    p22-phox Plasmídeo duplo de Nickase (h2)

    sc-400325-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    CYBA codifica a p22-phox, uma subunidade transmembrana do complexo NADPH oxidase de fagócitos (NOX2), necessária para a montagem adequada e a estabilização do núcleo catalítico gp91-phox/NOX2 e dos fatores citosólicos associados. Ao sustentar a transferência de elétrons para o oxigênio molecular, a p22-phox permite a geração regulada de espécies reativas de oxigênio (ROS), contribuindo para a defesa antimicrobiana, a sinalização redox e as respostas inflamatórias. CYBA também interage com outras enzimas da família NOX, vinculando-o a vias mais amplas dependentes de ROS que influenciam a função endotelial, a sinalização da imunidade inata e as respostas ao estresse oxidativo. A disrupção genética ou funcional de CYBA está associada a fenótipos de explosão oxidativa prejudicada e tem sido estudada no contexto de imunodeficiência, inflamação crônica e mecanismos de lesão tecidual induzida por ROS.

    p22-phox O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYBA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYBA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYBA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYBA interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.