Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419613
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- p19 INK4D/CDKN2D O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico p19 INK4D/CDKN2D, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:p19 INK4D/CDKN2D Anticorpo (E-11): sc-1665
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419613 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Cdkn2d** de camundongo codifica a p19 INK4D (CDKN2D), um inibidor de quinases dependentes de ciclina que restringe a progressão do ciclo celular ao se ligar às CDK4/6 e limitar a fosforilação de RB dependente de ciclina D, impondo assim o checkpoint de G1. A p19 INK4D integra sinais de vias mitogênicas e responsivas ao estresse para coordenar a proliferação com a diferenciação, particularmente em tecidos em desenvolvimento e adultos, onde é necessário um controle preciso da ciclagem celular. A regulação alterada da família INK4 e do eixo RB–E2F está amplamente associada à proliferação desregulada e à instabilidade genômica, tornando o CDKN2D um ponto útil para estudar o controle do ciclo celular em contextos relevantes para doenças. A perturbação de **Cdkn2d** também é utilizada para investigar relações compensatórias entre proteínas INK4 e seu impacto em programas semelhantes à senescência e no comprometimento de linhagem.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO p19 INK4D/CDKN2D (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cdkn2d em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cdkn2d, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cdkn2d na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína p19 INK4D/CDKN2D.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cdkn2d para a investigação da sinalização de p19 INK4D/CDKN2D, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cdkn2d críticos para a função p19 INK4D/CDKN2D
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cdkn2d para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cdkn2d. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo p19 INK4D/CDKN2D Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR p19 INK4D/CDKN2D (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cdkn2d para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cdkn2d definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.