Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Orai1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400901-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Orai1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Orai1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Orai1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ORAI1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Orai1 Anticorpo (G-2): sc-377281
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Orai1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400901-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Orai1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400901-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ORAI1 codifica a Orai1, a subunidade formadora do poro do canal de cálcio ativado por liberação de cálcio (CRAC), que medeia a entrada de Ca²⁺ operada por estoque após a depleção dos estoques de Ca²⁺ do retículo endoplasmático. A Orai1 coopera com a STIM1 para acoplar a detecção de Ca²⁺ no RE à abertura do canal na membrana plasmática, moldando sinais de cálcio citosólico que regulam a transcrição dependente de NFAT, programas de ativação celular e a homeostase do cálcio. Essa via é central para a sinalização de células imunes, a secreção e processos mais amplos regulados por cálcio, como proliferação e migração. A atividade desregulada de ORAI1 tem sido associada a disfunção imune e fenótipos inflamatórios, e a sinalização alterada de influxo de Ca²⁺ tem sido investigada em contextos que incluem miopatia e redes de sinalização associadas ao câncer.
Orai1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ORAI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ORAI1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ORAI1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ORAI1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.