Olfr45 더블 틈내기효소 플라스미드 (m2): sc-422035-NIC-2

마우스 Olfr45는 G 단백질 결합 수용체(GPCR) 슈퍼패밀리에 속하는 후각 수용체를 암호화하며, 후각 감각 상피에서 냄새 분자의 인지와 신호 전달에 관여한다. 리간드가 결합하면 OLFR45는 이종삼량체 G 단백질과 결합해 아데닐산 사이클레이스 활성, cAMP 생성, 그리고 하위 이온 채널 활성화를 조절함으로써 신경세포의 탈분극을 유도하고 후각 회로로의 입력을 촉진할 것으로 예상된다. 후각 수용체의 발현 또는 신호 전달의 변화는 감각 기능 장애 연구와 더 넓은 GPCR 조절 기전 연구(수용체 수송, 탈감작, 신경 분화 과정에서의 전사 조절 등)와 관련이 있다. Olfr45의 유전자 편집은 냄새 분자–수용체 특이성 매핑, 감각 뉴런에서의 GPCR 신호 전달 핵심 노드 규명, 그리고 후각 관련 표현형 및 신경상피 항상성을 조사하기 위한 마우스 모델 생성 등 기능 유전체학 실험을 뒷받침한다.

Olfr45 더블 니카제 플라스미드(m2)는 mouse 세포주 내 Olfr45 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Olfr45 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Olfr45의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Olfr45 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.