OFD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410551-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- OFD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase OFD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase OFD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para OFD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
OFD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410551-NIC | 20 µg | $410.00 |
OFD1 codifica uma proteína do centrossoma e do corpo basal necessária para a biogénese e a manutenção do cílio primário, onde dá suporte à organização do axonema e regula a composição dos satélites centriolares. Por meio dessas funções, a OFD1 influencia vias de sinalização dependentes da ciliogénese, incluindo Hedgehog e Wnt, bem como a progressão do ciclo celular e o tráfego polarizado. A perturbação de OFD1 desorganiza a estrutura ciliar e compromete a fidelidade da sinalização, associando-a a fenótipos ligados a ciliopatias, como anomalias craniofaciais e esqueléticas, envolvimento renal e défices do neurodesenvolvimento. Como regulador de cílios e do centrossoma, OFD1 é amplamente estudada em modelos de organogénese, polaridade celular e respostas ao stresse associadas a uma dinâmica ciliar defeituosa.
OFD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus OFD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de OFD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função OFD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com OFD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.