Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Oct3/4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400012-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Oct3/4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Oct3/4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Oct3/4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para POU5F1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Oct3/4 Anticorpo (C-10): sc-5279
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Oct3/4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400012-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Oct3/4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400012-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O POU5F1 humano codifica o fator de transcrição com domínio POU Oct3/4, um regulador central da pluripotência e da autorrenovação em células-tronco embrionárias e em células-tronco pluripotentes induzidas. O Oct3/4 atua em uma rede transcricional interconectada com fatores como SOX2 e NANOG para controlar o comprometimento de linhagem, a acessibilidade da cromatina e programas gênicos do desenvolvimento inicial. Sua atividade se integra a vias de sinalização que influenciam o estado das células-tronco, incluindo TGF-β/SMAD, WNT/β-catenina e FGF/ERK, coordenando assim sinais de proliferação e diferenciação. A expressão aberrante de POU5F1 está associada a programas transcricionais ligados à “stemness” em múltiplos cânceres e é amplamente utilizada como marcador de células indiferenciadas e da eficiência de reprogramação.
Oct3/4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus POU5F1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de POU5F1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função POU5F1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com POU5F1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.