Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Oct3/4 Plasmídeo de ativação de CRISPR (m): sc-422357-ACT
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Oct3/4O plasmídeo de ativação de CRISPR (m)e um mediador da ativação sinergética (SAM) dentro do sistema de ativada da transcrição, criado para a especificamente fazer a regulação genética crescente
- Oct3/4 Plasmídeo de ativação CRISPR (m) consiste em 3 pares de plasmídeos com a razão de massa de 1:1:1: um plasmídeo contento o código para Cas9 desativada
- O complexo SAM resultante se liga a uma região especifica a qual contem aproximadamente 200-250 nt na região upstream da região de inicio da transcrição e fornece um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética.
- Os gRNAs codificados pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR Oct3/4 (m) e pelo Plasmídeo de Ativação CRISPR Oct3/4 (m2) têm como alvo regiões reguladoras distintas a montante do local de início da transcrição de Pou5f1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Oct3/4 Anticorpo (C-10): sc-5279
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Oct3/4 Plasmídeo de ativação de CRISPR (m) | sc-422357-ACT | 20 µg | $397.00 |
Pou5f1 codifica o fator de transcrição com domínio POU Oct3/4 em camundongos, um regulador mestre da pluripotência e das decisões de linhagem no início do desenvolvimento embrionário. Oct3/4 coordena programas transcricionais com fatores centrais de “stemness”, como Sox2 e Nanog, para manter a autorrenovação e reprimir a diferenciação, integrando sinais de vias como LIF/STAT3, WNT/β-catenina e TGF-β/SMAD. A expressão alterada de Oct3/4 está associada a trajetórias de desenvolvimento perturbadas e é frequentemente usada como marcador molecular de estados semelhantes a células-tronco em biologia do câncer, em que redes de pluripotência desreguladas podem contribuir para a heterogeneidade tumoral. Assim, Pou5f1/Oct3/4 é central em estudos de reprogramação, regulação epigenética e estabilidade do destino celular em sistemas modelo de camundongo.
Oct3/4 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de Pou5f1 sem alterar a sequência de ADN subjacente.
Oct3/4 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (m) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus Pou5f1 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.
Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição Pou5f1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de Oct3/4. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus Pou5f1 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de Oct3/4 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via Oct3/4 em células tumorais com expressão de Pou5f1 silenciada ou reduzida.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.