OC-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-434195

Visão geral

Onecut3 (OC-3) é um fator de transcrição homeobox da família ONECUT em camundongos que se liga a motivos específicos de DNA para coordenar decisões de destino celular e o padrão de organização dos tecidos durante o desenvolvimento. Ele contribui para programas de regulação gênica envolvidos em diferenciação, morfogênese e manutenção de identidades celulares especializadas, integrando-se a redes transcricionais mais amplas que moldam a organogênese. Como regulador nuclear, o OC-3 influencia vias a jusante que governam a especificação e a maturação de linhagens celulares, o que o torna relevante para estudos de biologia do desenvolvimento e do controle epigenético da transcrição. Programas transcricionais associados ao Onecut3 desregulados têm sido relacionados na literatura a estados de diferenciação alterados e a fenótipos relevantes para doenças em sistemas modelo nos quais vias de desenvolvimento estão perturbadas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OC-3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Onecut3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Onecut3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Onecut3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OC-3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Onecut3 para a investigação da sinalização de OC-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Onecut3 críticos para a função OC-3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Onecut3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo OC-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo OC-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Onecut3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo OC-3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR OC-3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Onecut3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Onecut3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.