
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
OBSL1CRISPR激活质粒(h) | sc-407284-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
OBSL1CRISPR激活质粒(h2) | sc-407284-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
OBSL1(obscurin-like protein 1)编码一种大型细胞骨架适配蛋白,可与肌动蛋白–肌球蛋白网络相互作用,并参与细胞内结构组织与机械信号转导。它与维持细胞形态、黏附动态以及影响细胞迁移和组织完整性的细胞骨架重塑过程有关。OBSL1 参与蛋白–蛋白相互作用网络,协调信号传递与支架组装,将细胞骨架结构与调控生长和分化的更广泛调控通路连接起来。OBSL1 的遗传性破坏与 3M 综合征及相关生长表型相关,因此对研究与细胞骨架相关的发育机制以及疾病相关的细胞应激反应具有重要意义。
OBSL1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性OBSL1的表达。
OBSL1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的OBSL1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于OBSL1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性OBSL1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的OBSL1位点,并能够研究内源性位点上依赖于OBSL1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在OBSL1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟OBSL1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。