OB-cadherin Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-401051-LAC

CDH11 codifica a OB-caderina, uma molécula de adesão célula–célula dependente de cálcio que sustenta interações homofílicas e a formação do complexo caderina–catenina nas junções aderentes. Por meio do acoplamento à remodelação da actina e à sinalização nas junções, a OB-caderina influencia a polaridade celular, a migração e a morfogênese tecidual, e pode modular vias ligadas à transição epitélio–mesênquima e à organização do estroma. Em tecidos humanos, CDH11 é amplamente estudado em linhagens mesenquimais, como osteoblastos e fibroblastos, nas quais contribui para a remodelação da matriz extracelular e para o acoplamento mecânico intercelular. A expressão desregulada de CDH11 tem sido associada à remodelação patológica de tecidos e ao comportamento invasivo em diversos contextos de doença, o que motiva seu uso como marcador e como nó funcional em pesquisas relacionadas à adesão e à fibrose.

As Partículas de Ativação Lentivirais OB-cadherin (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de CDH11 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais OB-cadherin (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição CDH11, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de OB-cadherin. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo CDH11 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.