OATP-H CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404706

概要

SLCO4C1 は、ヒトの有機アニオン輸送ポリペプチド OATP-H（OATP4C1）をコードしており、細胞膜を介してさまざまな内因性代謝産物や異物様の有機アニオンを、ナトリウム非依存的に取り込む多基質性の溶質キャリアです。このトランスポーターは、循環中化合物に対する細胞の曝露を規定し、その後の代謝処理や解毒経路に影響を与える膜輸送プロセスに寄与します。OATP ファミリー分子の発現や活性の変化は、基質の組織分布の変動や代謝恒常性の攪乱と関連づけられており、SLCO4C1 は輸送に起因する表現型を研究するうえで有用な標的となります。生物医学研究では、SLCO4C1 の改変により、トランスポーター—基質関係の機序的解析や、それが細胞シグナル伝達およびストレス応答に及ぼす影響の検討が可能になります。

OATP-H CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLCO4C1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLCO4C1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLCO4C1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、OATP-Hタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、OATP-Hシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLCO4C1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• OATP-Hの機能に不可欠なSLCO4C1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLCO4C1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• OATP-H CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびOATP-H CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLCO4C1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  OATP-H HDRプラスミド（h）および OATP-H HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLCO4C1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLCO4C1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。