OATP-H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404706

Visão geral

SLCO4C1 codifica o polipeptídeo transportador de ânions orgânicos humano OATP-H (OATP4C1), um transportador multiespecífico da família SLC que medeia a captação, independente de sódio, de uma variedade de metabólitos endógenos e de ânions orgânicos de caráter xenobiótico através de membranas celulares. Esse transportador contribui para processos de transporte transmembranar que moldam a exposição celular a compostos circulantes e influenciam o processamento metabólico subsequente e vias de desintoxicação. Alterações na expressão ou na atividade de membros da família OATP têm sido associadas a mudanças na distribuição tecidual de substratos e a perturbações na homeostase metabólica, tornando o SLCO4C1 um alvo útil para estudar fenótipos conduzidos por transporte. Na pesquisa biomédica, a perturbação de SLCO4C1 permite a investigação mecanística das relações transportador–substrato e de seu impacto na sinalização celular e nas respostas ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO OATP-H (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene SLCO4C1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do SLCO4C1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do SLCO4C1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína OATP-H.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de SLCO4C1 para a investigação da sinalização de OATP-H, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) SLCO4C1 críticos para a função OATP-H
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos SLCO4C1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo OATP-H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo OATP-H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus SLCO4C1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo OATP-H Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR OATP-H (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia SLCO4C1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo SLCO4C1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.