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NY-ESO-1双切口酶质粒(h) | sc-418340-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NY-ESO-1双切口酶质粒(h2) | sc-418340-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CTAG1B 编码 NY-ESO-1,这是一种癌睾抗原,在正常成人组织中的表达高度受限,但在多种肿瘤类型中常见异位表达。来源于 NY-ESO-1 的肽段可被蛋白酶体加工,并呈递于 MHC I 类和 II 类分子复合体上,从而将 CTAG1B 的表达与抗原加工与呈递通路以及肿瘤免疫原性联系起来。其表达通常与表观遗传失调相关,包括 DNA 低甲基化和染色质重塑,并被用作研究恶性肿瘤中生殖系基因再激活程序的标志物。围绕 CTAG1B/NY-ESO-1 的研究也支持对转录调控、免疫识别机制以及与肿瘤相关抗原表达相关的细胞表型进行探索。
NY-ESO-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CTAG1B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTAG1B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CTAG1B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CTAG1B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。