Nup88 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422392
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nup88 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Nup88, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nup88 Anticorpo (H-7): sc-365868
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nup88 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422392 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Nup88 (nucleoporina de 88 kDa) é um componente essencial do complexo do poro nuclear que contribui para o transporte nucleocitoplasmático e para a organização geral do envelope nuclear. Ao se associar a outras nucleoporinas e a receptores de transporte, a Nup88 ajuda a regular o tráfego de proteínas e RNAs que controlam programas transcricionais, a progressão do ciclo celular e a sinalização responsiva ao estresse. Alterações na abundância ou na localização da Nup88 têm sido associadas a defeitos na fidelidade do transporte nuclear e na manutenção do genoma, processos frequentemente perturbados em contextos proliferativos e do neurodesenvolvimento. Assim, a Nup88 de camundongo é amplamente utilizada para investigar a regulação dependente do poro nuclear da sinalização e da expressão gênica na fisiologia normal e em estados celulares relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nup88 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nup88 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nup88, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nup88 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nup88.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nup88 para a investigação da sinalização de Nup88, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nup88 críticos para a função Nup88
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nup88 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Nup88 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Nup88 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nup88. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Nup88 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Nup88 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nup88 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nup88 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.