Nup50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406550

Visão geral

NUP50 codifica a Nup50, um componente dinâmico do complexo do poro nuclear que participa do transporte nucleocitoplasmático ao modular o tráfego e a reciclagem, no interior do núcleo, de cargas dependentes de importina-α/β. Por meio de suas interações no cesto nuclear, a Nup50 ajuda a coordenar a cinética de importação nuclear com processos mais amplos, como a progressão do ciclo celular, a regulação transcricional e a manutenção da arquitetura nuclear. A desregulação das vias de transporte nuclear e da homeostase do complexo do poro nuclear é frequentemente implicada na instabilidade genômica e em programas de sinalização alterados relevantes para a biologia do câncer e para outros distúrbios caracterizados por compartimentalização nucleocitoplasmática comprometida. Assim, NUP50 é comumente estudado no contexto da regulação do transporte nuclear, da proteostase e da sinalização responsiva ao estresse.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Nup50 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NUP50 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NUP50, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NUP50 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Nup50.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NUP50 para a investigação da sinalização de Nup50, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NUP50 críticos para a função Nup50
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NUP50 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Nup50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Nup50 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NUP50. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Nup50 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Nup50 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NUP50 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NUP50 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.