Nucling Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406671-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NuclingO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nucling (h) e o Plasmídeo Double Nickase Nucling (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UACA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Nucling Anticorpo (A-5): sc-515005
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nucling Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406671-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nucling Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406671-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UACA codifica a Nucling, uma proteína nuclear implicada na regulação da sinalização apoptótica e das respostas celulares ao estresse, com funções descritas na coordenação de eventos nucleares que influenciam decisões de sobrevivência celular. A Nucling tem sido associada à modulação de programas transcricionais relacionados ao NF-κB e de outras vias de transdução de sinais que conectam estímulos inflamatórios à apoptose. Alterações na expressão de UACA foram observadas em múltiplos contextos relevantes para doenças, incluindo câncer e condições associadas ao sistema imune, nas quais a desregulação da morte celular e da sinalização de estresse contribui para a patogênese. Como resultado, UACA/Nucling é frequentemente estudado em mecanismos de apoptose induzida por estresse, controle transcricional e crosstalk entre vias que afetam a homeostase celular.
Nucling O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UACA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UACA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UACA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UACA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.