Nrf3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404543-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nrf3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nrf3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Nrf3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NFE2L3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nrf3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nrf3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NFE2L3 codifica o fator de transcrição bZIP do tipo cap’n’collar Nrf3, um regulador da expressão gênica responsiva ao redox e de programas de proteostase. O Nrf3 participa da sinalização de estresse oxidativo e se conecta a processos associados ao retículo endoplasmático (RE), incluindo o controle transcricional de subunidades do proteassoma que modulam a degradação de proteínas e a adaptação celular. Em células humanas, a atividade desregulada de Nrf3 tem sido associada a alterações na proliferação, diferenciação e tolerância ao estresse, tornando-o relevante para estudos de biologia tumoral e de microambientes inflamatórios. Sua conectividade de vias com redes de resposta antioxidante e com a função do sistema ubiquitina–proteassoma sustenta investigações mecanísticas sobre como as células mantêm a homeostase sob estresse metabólico e genotóxico.
Nrf3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NFE2L3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NFE2L3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NFE2L3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NFE2L3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.