NPT2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402216

개요

SLC34A1은 인간의 나트륨 의존성 인산염 수송 단백질 2A(NPT2)를 암호화하며, NPT2는 상피세포에서 Na+ 기울기에 결합된 방식으로 무기인산염을 전기발생적으로 흡수하도록 매개하는 첨단(apical) 막 공동수송체입니다. NPT2는 인산염 항상성의 핵심 결정인자이며, 비타민 D 대사, 부갑상선호르몬(PTH) 신호, 그리고 FGF23에 의해 조절되는 인산염 처리 경로와 교차하는 신장 근위세뇨관 재흡수 경로에 관여합니다. SLC34A1 기능의 변화는 신장결석(nephrolithiasis), 저인산혈증, 무기질화 결함과 연관된 표현형을 포함하여 인산염 균형 이상 질환과 관련되어 보고되어 왔으며, 따라서 상피 수송 조절과 대사 신호전달을 연구하는 데 중요한 표적입니다. 세포 수준에서 SLC34A1의 교란은 막 수송(trafficking), 수송체 동역학, 그리고 인산염 의존적 생체에너지 및 생체무기질 대사의 조절을 규명하는 데 활용될 수 있습니다.

NPT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 SLC34A1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 SLC34A1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 SLC34A1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NPT2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NPT2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 SLC34A1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NPT2 기능에 중요한 SLC34A1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 SLC34A1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NPT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NPT2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 SLC34A1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NPT2 HDR 플라스미드 (h) 및 NPT2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 SLC34A1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 SLC34A1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.