NPM3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421944

Visão geral

O gene murino Npm3 codifica a nucleofosmina/nucleoplasmina 3 (NPM3), uma proteína nucleolar implicada na biogênese dos ribossomos e na homeostase do nucléolo por meio da regulação do processamento de rRNA e da montagem de ribonucleoproteínas. A NPM3 participa de processos associados à cromatina e da dinâmica nucleocitoplasmática ao interagir com outros fatores nucleolares, conectando a função do nucléolo à progressão do ciclo celular e às respostas ao estresse. A perturbação de proteínas nucleolares nessa via pode influenciar o controle da proliferação, a estabilidade genômica e programas transcricionais relevantes para a transformação oncogênica e a biologia das neoplasias hematológicas. Como componente de arcabouço nucleolar, a NPM3 oferece um ponto de entrada útil para dissecar como a integridade do nucléolo modula a sinalização de crescimento e a adaptação celular ao estresse proteotóxico ou genotóxico.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NPM3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Npm3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Npm3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Npm3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NPM3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Npm3 para a investigação da sinalização de NPM3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Npm3 críticos para a função NPM3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Npm3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NPM3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo NPM3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Npm3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NPM3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR NPM3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Npm3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Npm3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.