Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
NOXA Antibody (F-3): sc-515840. Western blot analysis of NOXA expression in non-transfected: sc-117752 (A) and human NOXA transfected: sc-117157 (B) 293T whole cell lysates.
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NOXA双切口酶质粒(h): sc-400498-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- NOXA 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- NOXA双切酶质粒（h）和NOXA双切酶质粒（h2）编码针对PMAIP1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：NOXA: sc-515840，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
NOXA双切口酶质粒(h) | sc-400498-NIC | 20 µg | $410.00 |
PMAIP1 编码 BH3-only 蛋白 NOXA。NOXA 是一种对 p53 有反应的促凋亡调控因子，可通过中和抗凋亡的 BCL2 家族成员来促进线粒体外膜通透化（MOMP），并且对 MCL1 和 BCL2A1 具有很强的选择性。NOXA 将 DNA 损伤与致癌性应激信号整合起来，启动内源性凋亡通路，从而影响半胱天冬酶（caspase）激活、细胞适应性以及应激诱导的细胞命运决定。其表达水平与周转也会受到泛素介导的蛋白质稳态调控，以及 p53 及相关应激通路下游转录程序的进一步影响。PMAIP1–NOXA 轴的失调常见于凋亡敏感性改变的研究场景中，包括肿瘤生物学以及对线粒体凋亡产生耐受/抗性的机制研究。
NOXA 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 PMAIP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对PMAIP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏PMAIP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了PMAIP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。