Nox4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400298-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Nox4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Nox4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Nox4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NOX4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Nox4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400298-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nox4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400298-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOX4 codifica a Nox4, uma subunidade catalítica da família das NADPH oxidases que gera constitutivamente espécies reativas de oxigênio (EROs), principalmente peróxido de hidrogênio, para sustentar a sinalização redox. A atividade da Nox4 influencia vias que regulam a diferenciação celular, o remodelamento da matriz extracelular e respostas adaptativas à hipóxia e ao estresse metabólico, com efeitos a jusante sobre a sinalização associada a MAPK, TGF-β/SMAD e NF-κB. Em tecidos humanos, a produção desregulada de EROs dependente de NOX4 tem sido associada a fenótipos de estresse oxidativo implicados no remodelamento fibrótico, na disfunção vascular e em redes de sinalização associadas a tumores. Como uma fonte de EROs relativamente sustentada em comparação com oxidases ativadas por estímulos, a Nox4 é amplamente estudada por seu papel na organização da homeostase redox compartimentalizada e de programas transcricionais.
Nox4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NOX4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NOX4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NOX4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NOX4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.