Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Notch1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400167-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Notch1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Notch1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Notch1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NOTCH1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Notch1 Anticorpo (A-8): sc-376403
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Notch1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400167-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Notch1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400167-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NOTCH1 codifica o receptor transmembranar Notch1, um mediador central da sinalização justácrina que controla decisões de destino celular, o padrão de organização dos tecidos e a manutenção de células-tronco/progenitoras. A ligação do ligante desencadeia o processamento proteolítico e a liberação do domínio intracelular de Notch, que se transloca para o núcleo para regular programas de transcrição em conjunto com RBPJ/CSL e coativadores. A sinalização de Notch1 interage com vias que governam proliferação, diferenciação, apoptose e programas de transição epitélio-mesênquima, moldando respostas de desenvolvimento e de homeostase em múltiplos tecidos. A atividade desregulada de NOTCH1 é frequentemente implicada na oncogênese, em defeitos de diferenciação de células imunes e em distúrbios congênitos do desenvolvimento, o que a torna um ponto-chave para estudos mecanísticos de vias de sinalização.
Notch1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NOTCH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NOTCH1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NOTCH1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NOTCH1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.