Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NOS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418493-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NOS1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NOS1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NOS1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NOS1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NOS1 Anticorpo (A-11): sc-5302
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NOS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418493-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NOS1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-418493-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano NOS1 codifica a sintase de óxido nítrico neuronal (nNOS), uma enzima regulada por cálcio/calmodulina que gera óxido nítrico a partir de L-arginina e, assim, modula a sinalização via cGMP. O óxido nítrico derivado de NOS1 regula a neurotransmissão, a plasticidade sináptica, o acoplamento neurovascular e o tônus do músculo liso, com funções adicionais na homeostase redox por meio da formação de espécies reativas de nitrogênio. Nas células, a atividade de NOS1 integra-se ao influxo de cálcio dependente do receptor NMDA, à sinalização MAPK e a complexos ancorados por proteínas de scaffold que localizam a nNOS em microdomínios subcelulares específicos. A desregulação da sinalização de NOS1 tem sido implicada em fenótipos neurológicos e psiquiátricos, no processamento da dor e na regulação cardiovascular, tornando-a um alvo útil para estudos mecanísticos de vias dependentes de NO.
NOS1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NOS1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NOS1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NOS1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NOS1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.