NMDAζ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400593

Visão geral

GRIN1 codifica a subunidade essencial NR1 (NMDAζ1) dos receptores de N-metil-D-aspartato (NMDA), canais iônicos ativados por ligante que mediam a neurotransmissão excitatória permeável a Ca²⁺. A sinalização dos receptores NMDA integra entradas glutamatérgicas com a despolarização da membrana para regular a plasticidade sináptica, a potenciação de longo prazo e programas de expressão gênica dependentes de atividade. Por meio do acoplamento a componentes de ancoragem da densidade pós-sináptica e a vias a jusante como CaMK/CREB e MAPK/ERK, GRIN1 influencia o desenvolvimento neuronal, a maturação de circuitos e as respostas ao estresse excitotóxico. Alterações na função ou na expressão de GRIN1 têm sido implicadas em fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, suscetibilidade a crises convulsivas e disfunção sináptica relevante para múltiplos distúrbios do sistema nervoso.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NMDAζ1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GRIN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GRIN1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GRIN1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NMDAζ1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GRIN1 para a investigação da sinalização de NMDAζ1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GRIN1 críticos para a função NMDAζ1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GRIN1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NMDAζ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NMDAζ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GRIN1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NMDAζ1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NMDAζ1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GRIN1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GRIN1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.