NMDAε4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401683-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NMDAε4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NMDAε4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NMDAε4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRIN2D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NMDAε4 Anticorpo (G-10): sc-17822
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NMDAε4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401683-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NMDAε4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401683-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIN2D codifica a subunidade humana do receptor NMDA NMDAε4 (GluN2D), um componente de canal iônico controlado por ligante que se associa à GluN1 para formar receptores funcionais de N-metil-D-aspartato. A NMDAε4 contribui para a transmissão sináptica glutamatérgica ao regular o influxo de Ca²⁺, a cinética de abertura/fechamento do receptor e a sinalização a jusante dependente de atividade, que molda o desenvolvimento neuronal e a excitabilidade dos circuitos. Por meio do acoplamento a vias dependentes de cálcio, influencia a plasticidade sináptica, programas de transcrição e respostas ao estresse excitotóxico no sistema nervoso central. Variações ou expressão desregulada de GRIN2D têm sido associadas na literatura a fenótipos neurodesenvolvimentais e relacionados a crises epilépticas, sustentando seu uso em estudos mecanísticos de sinalização por glutamato e função de redes neuronais.
NMDAε4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRIN2D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRIN2D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRIN2D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRIN2D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.